ENZIM-ENZIM YANG BERGUNA DALAM DIAGNOSIS KLINIK DASAR UMUM

Enzim ialah katalisator yang menggalakan reaksi tanpa langsung ikut serta dalam reaksi itu. Hamper semua reaksi untuk menyelenggarakan fungsi-fungsi tubuh yang tak terhingga banyaknya mempunyai enzimnya sendiri. Tiap enzim yang jenis-jenisnya juga tak terhitung memiliki substrat spesifik. Sedangkan hasil reaksi spesifik juga. Kebanyakan dari enzim-enzim terdapat di dalam sel; ada yang terdapat di dalam banyak tipe sel. Di dalam klinik hanya sedikit sekali enzim yang di periksa secara rutin. Untuk mempelajari penyakit-penyakit yang didasari genetika digunakan analisis enzim yang canggih, tetapi di dalam lapangan diagnostic hanyalah beberapa enzim yang di tentukan, yakni penyimpangan dari nilai normalnya dapat digunakan guna menunjuk kepada atau dapat membenarkan persangkaan tentang salah satu kelainan. Karena kbanyakan enzim ada di dalam sel, maka terdapatnya enzim dalam cairan tubuh menjadi petunjuk bahwa telah rerjadi perubahan pada dinding sel, sehingga molekul enzim dapat menembusnya.

KADAR ENZIM  DALAM SERUM

            Dalam darah beredar ada banyak macam enzim dengan kadar rendah dan fungsinya dalam sirkulasi darah tidak di ketahui; adanya itu mungkin hanya pencerminan dari sintesis dan destruksi dan sel-sel yang terus menerus berlangsung. Kadar enzim dalam darah yang meningkat adalah akibat kerusakan sel yang mengandung enzim itu atau mungkin juga akibat perubahan yang tidak mematikan sel tetapi sudah melemahkan permebealitas dinding sel sehingga makromoleku-makromolekul dapat menembusnya dan terlepas ke dalam cairan ekstrasel. Kadang-kadang kadar enzim dalam serum meningkat apabila sel yang berisi enzim itu bertambah banyak atau bertambah aktif. Peningkatan juga terjadi kalau mekanisme yang normalnya ada untuk mengekskresikan atau merombak enzim menjadi berkurang.

            Kadar enzim dalam serum yang menurun jarang mempunyai makna diagnostic Karena hanya ada beberapa enzim yang kadarnya cukup tinggi. Penurunan itu dapat terjadi jika jumlah sel pembuat enzim yang bersangkutan berkurang, jika ada hambatan dalam sintesis protein secara umum atau secara khusus dan jika ekskresi atau degradasi enzim meningkat.

SPESIFITAS

            Bermacam-macam reaksi metabolic yang sama berlansung dalam banyak macam jaringan, sehingga enzim-enzim yang tersangkut terdapat dalam banyak tipe sel. Enzim-enzim yang mempunyai fungsi metabolic bersifat lebih spesifik dan adanya hanya didalam satu tipe  saja atau hanya dalam sel-sel yang khusus. Tujuan memeriksa enzim ialah terutama untuk mendapat petunjuk tentang organ mana yang sedang sakit dan sedapat-dapatnya fungsi mana dari organ itu terganggu, bahkan kalau mungkin sel jenis apa dalam organ itu. Khususnya enzim yang hanya terdapat di dalam sel tertentu, atau lokasitertentu, sangat bermanfaat untuk tujuan melokalisasinya kelainan. Banyak enzim  yang lokasinya tersebar mempunyai perbedaan-perbedaan kecil di antara dirinya, tergantung lokasinya. Bentuk-bentuk itu bernama isoenzim yang cici-cirinya berselisih  berdasarkan struktur imunologi, fisik atau kimia sesuai lokasi asalnya masing-masing. Kerapkali makna pengukuran enzim total diperbesar dengan fraksionasi satu macam enzim menjadi beberapa isoenzim.

TERMINOLOGI

Terminology untuk member nama dan mengukur enzim belum mantap. Komisi mengenai Enzim dari Uni Biokimia Internasional (the Commission on Enzymes of the International Union Of Biochemitry, IUB) berusaha untuk mengadakan klasifikasi enzim atas dasar fungsi biokimianya dengan memberi angka kepada enzim memakai kelas, subkelas dan nomor identifikasi spesifik. IUB juga menentukan nama yang menjelaskan reaksi spesifik yang digalakkan oleh enzim yang bersangkutan, dan sering juga nama praktis untuk dipakai sehari-hari. Beberapa enzim yang sudah bertahun-tahun dipelajari mempunyai nama-nama berbeda untuk enzim yang itu-itu juga, selain itu banyak enzim dikenal dengan singkatan yang banyak dipakai, meskipun itu tidak disebut oleh IUB; singkatan-singkatan itu yang tersusun dari dua atau tiga huruf mudah kditerapkan untuk bahasa yang dilafalkan, ditulis dan dipakai dalam/ computer. Sebagai contoh: enzim yang mengkatalisis reaksi reversibel (kreatine+ATP         kreatinefosfat + ADP) mempunyai nama resmi ATP: kreatinefosfottransferase; nomor yang di berikan oleh EC (enzyme commission) adalah 2.7.3.2. tetapi nama populernya adalah kreatinefosfokinase (CPK, Creatine phosphokinase) atau kreatine kinase (CK, Creatine kinase).

SATUAN ENZIM

            Upaya lain untuk melakukan standarisasi adalah menggunakan satuan internasional, SI (IU, international units) dalam melaporkan aktifitas enzim.  Satu SI dari enzim apapun juga ialah banyaknya enzim yang dapat mengkatalisis transformasi 1 µmol substrat dalam satu menit pada kondisi tertentu. Banyaknya dari enzim itu yang disebut dengan SI tidak sama jika disebut dengan angka mutlak; SI itu tidak menggambarkan nilai yang dapat dipakai guna membandingkan satu enzim dengan enzim lain dengan cirri-cirinnya berlain-lainan. Dalam pembahasan enzim-enzim berikut, nilai-nilai rujukan rujukan dan prosedur pengukuran tidak disebut. Perbedaan-perbedaan dalam tehnik dan satuan yang dipakai untuk melaporkan hasil oleh masing-masing laboratorium menharuskan pemakai jasa laboratorium untuk menyesuaikan diri dengan nilai rujukan pada laboratorium itu, kalau mau menilai keadaan pasien.

AMINOTRANSFERASE (TRANSAMINASE)

Sebagai nama untuk enzim yang mengkatalisis perpindahan reversible satu gugusan amino dari asam amino ke asam alfa-keto, sekarang lebih baik dipakai aminotransferase. Istilah lama transferase tidak sesuai dengan rekomendasi dari komisi mengenai enzim tentang aktivitas enzim. Kedua macam aminotransferase yang paling sering dukur ialah alanine aminotransferase (ALT) yang dulu disebut glutamate-piruvat transminase (GPT) dan aspartat aminotransferase (AST) yang dulu bernama glutamate-oxaloasetat transminase (GOT). Baik nama-nama yang baru, maupun yang lama masih dipakai berdampingan, tetapi nama baru disukai dan itulah yang dipakai dalam buku ini.  

FISIOLOGI

            Asam amino ikut serta dalam banyak reaksi dan aminotransferase tersebar luas. Hati yang merupakan pusat sintesis protein dan penyaluran asam amino ke dalam jalur-jalur biokimia lain, adalah salah satu organ yang sangat banyak mengandung aminotransferase. Hanya sel-sel hati yang memiliki konsentrasi ALT tinggi biarpun ginjal, jantung dan otot bergaris mengandung ALT dalam jumlah sedang. Banyak ATS ada dalam hati dan didalam sel miokard, sedangkan AST juga terdapat dalam konsentrasi bermakna, biarpun kurang, dalam otot bergaris, ginjal, otak dan pancreas. Hepatosit berisi 3-4 kali lebih banyak AST dari ALT. akan tetapi kadar ALT dalam serum menjadi petunjuk yang lebih sensitive kea rah kerusakan hati karena sangat sedikitnya  kondisi bukan hati berpengaruh kepada kadar ALT dalam serum.

KEGUNAAN AMINOTRASFERASE DALAM DIAGNOSTIK (SELAIN PENYAKIT HATI)

Kadar aspartat aminotransferase meningkat pada banyak kejadian. Bilat otot jantung menderita kerusakan oleh iaschemia, AST dalam serum meningkat setelah 6-8 jam; puncak kadar di capai antara 24-48 jam. Sedangkan pemulihan kepada normal terjadi antara 72- 96 jam. Peningkatan AST terjadi dalam kurun waktu antara meningginya kreatine fosfokinase (CPK ) yang sangat dini terjadi dan cepat pula menurun lagi, yakni dalam dwaktu 48 jam dan meningginya laktat dehidrogenase (LDH) yang baru mulai meningkat 12 jam atau lebih setelah terjadi infark dan menetap pada nilai tinggi itu sampai seminggu atau lebih. Penigkatan AAST tidak dapat dipakai selaku satu-satunya indicator enzimatik utnuk adanya infark miokard karena ia meningkat juga pada kondisi-kondisi lain yang perlu ikut dipertimbangkan  dalam diagnosis banding serangan jantung. AST dalam serum meninggi pada renjatan atau kolaps sirkulasi darah apa juga sebabnya, mungkin sekali karena terjadi kerusakan hati. Pancreatitis akut juga mendatangkan kadar AST yang sangat tinggi. Peningkatan sedang mungkin muncul pada aritmia jantung dan pada ischemia yang tidak berlanjut menjadi infark. Keadaan-keadaan yang berpengaruh kepada kadar AST dapat di tmeukan dalam tabel 1.

AMILASE

FISIOLOGIS

Amylase ialah enzim cerna yang memecahkan zat pati (amilum) menjadi molekul-molekul karbohidrat yang lebih kecil, lokasi berfungsinya adalah di luar sel. Enzim itu disekresikan ke dalam air liur dan kedalam saluran cerna bagian atas dan mendepolimer zat-zat pati dalam makanan mejadi potongan-potongan dapat diserap. Banyak jenis sel mempunyai aktivitas amylase, tetapi yang bermakna  dalam fisiologis dan diagnosis adalah kelenjar ludah dan pancreas. Amylase yang terdapat pada serum normal berasal dari kelenjar ludah dan dari pancreas; kalau terjadi peningkatan patologis, itu hamper slalu dating dari pancreas

KEGUNAAN UNTUK DIAGNOSIS

            Amylase dalam serum meningkat pada radang pancreas. Mungkin sekali karena sel-sel sekretorik pecah dan juga karena enzim yang ada di luar sel diserap dari usus dan dari cairan asites melalui saluransaluran limfe dalam peritoneum yang melebar dan lebih mudah ditembus. Pada pancreatitis akut amylase dalam serum mulai meningkat dalam waktu 6-24 jam. Amylase mudah menembus filter glomeluri, sehingga beberapa jam setelah terjadi penigkatan dalam serum, urin juga menunjukan kadar meningggi. Amylase dalam serum hanya meninggi selama beberapa hari,  dalam waktu 2-7 hari nilai menjadi normal kembali. Jika tes diagnostic dilakukan setelah penyakit berlangsung beberapa hari, ada kemungkinan kadar amylase telah menyusut kadar yang bersifat non-diagnostik. Nilai yang meningkat dala urin masih dapat bertahan beberapa hari lagi, jadi memeriksa urin berguna dalam evaluasi klinis.

Table1.  Kondisi Yang Meningkatkan Aspartat Aminotransferare

(Glutamat-Oxaloasetat Transaminase)

Peningkatan tegas (5 atau lebih kali nilai normal)

            Kerusakan hematoseluler akut

            Infarct miokard

            Kolaps sirkulasi (renjatan)

            Pancreatitis akut

            Mononucleosis infeksiosa

Peningkatan sedang (3-5 kali nilai normal)

            Obstruksi saluran empedu

            Aritmia jantung

            Gagal jantung kongestif

            Tumor hati (metastasis atau primer)

            Dystrophia muscularis

Peningkatan ringan (sampai 3 kali normal)

            Perikarditis

            Sirosis

            Infark paru

            Delirium tremeus

            Cerebrovascular accident

PENYULIT PADA PENETAPAN

Beberapa hal berpengaruh kepada kadar amylase dalam serum. Kadar itu memuncak apabila kepada pasien diberikan obat yang melakukan konstriksisfinkter ductus pancreaticus. Yang paling sering menyebabkan itu ialah morfin. Darah pasien harus di ambil sebelum kepadanya deberikan morfin untuk meringankan nyeri abdomen yang mungkin disebabkan oleh radang pancreas. Codein, chlorothiazide, pancreozymin atau secretin juga mendatangkan kenaikan amylase dalam serum. Kadar sedikit meningggi pada pasien dengan gagal ginjal karena ekskresi terhambat. Kadar glukosa yang tinggi menekan nilai amylase dalam serum, nilai amylase menurun sekali kalau darah untuk pemeriksaan diambil dari pasien yang sedang diinfus glukosa. Keadaan patologis yang berpengaruh kepada amylase dalam serum didapat di table 2

Tabel 2. Kondisi yang meningkatkan amylase dalam serum

Peningkatan tegas (5 atau lebih kali nilai normal)

            Pancreatitis akut

            Pseudokista dalam pancreas

            Pemberian morfin

Peningkatan sedang (3-5 kali nilai normal)

            Karsinoma pancreas di kepala pancreas (tahap akhir)

            Parotitis (Gondongan)

            Radang kelenjar liur

            Ulcus pepticum perforans (kadang-kadang)

CHOLINESTERASE

FISIOLOGI

Cholinesterase itu lain dari enzim lain-lain oleh karena makna untuk diagnosis terletak dalam menurunnya- bukan meningkatnya – kadar dalam serum. Serum normal berisi banyak dari suatu enzim yang menghidrolisis asetilcholine pekat dan juga menceraikan ester-ester choline. Enzim itu sering dinamai pseudocholinesterase untuk membedakannya dari asethilcholinesterase sejati yang substratnya sangat spesifik terbatas kepada asetilcholine dan yang optimal bekerja terhadap asetilcholine dalam konsentrasi rendah⁶  . asetilcholinesterase (AcCHS, acetylcholinesterase) terutama ada pada ujung saraf dan di dalam eritrosit; dalam keadaan normal hanya ada sedikit sekali dalam serum. Pseudocholinesterase (CHS) dalam serum berasal dari hati. Biarpun CHS dalam serum menurun pada banyak penyakit hepatoseluler, teristimewa pada proses destruktif, mengukur CHS hanya dapat menambah sedikit saja dalam diagnostic penyakit hati.

Kedua macam cholinesterase di hambat oleh senyawa organofosfor. Menurunnya kadar CHS dalam seru merupakan petunjuk sensitive kepada terkenanya seorang oleh insektisida jenis organofosfor. Kadar AcCHS dalam eritrosit menurun kalau terkena secara berat, CHS dalam serum berubah dini. Jika tidak terkena lagi, CHS dalam serum lebih dulu pulih dari AcCHS dalam eritrosit. CHS dalam serum kurang berguna untuk menunjuk seorang pernah terkena organofosfor dibandingkan AcCHS dalam serum² .

RESISTENSI TERHADAP DUBUCAINE

            CHS mempunyai variant genetic. Pada orang yang homozigot dalam variant itu ditemukan aktifitas total yang menurundalam serum, sedangkan enzimnya mempunyai enzim berlainan. CHS normal dihambat oleh dibucaine; yang abnormal resistant terhadap dibucaine. Variant abnormal itu tidak menginaktifkan suksinilcholine, yakni semacam inhibitor asetilchiline yang sering dipakai untuk merintis anesthesia. Orrang yang homozigot dalam variant abnormal itu, mengalami depresi pernapasan yang berkepanjangan kalau diberikan suksinilcholine. Resistensi terhadap dibucaine dapat dipakai untuk menyatakan adanya CHS abnormal.

KREATINE FOSFOKINASE

FISIOLOGI

Kreatine fosfokinase (CPK, creatinephosphokinase) yang juga dinamai kreatinekinase mengkatalis pertukaran fosfat secara reversibel antara kreatine dan adenosinetrifosfat (ATP, adenosinetriphosphate). Ia memainkan perananpenting dalam menyimpan dan melepaskan energy dalam sel dan didapat hamper secara eksklusif dalam otot bergaris, otot jantung dan dalam berjumlah kecil juga dalam otak. Kadar CPK dalam serum memuncak tegas setelah terjadi kerusakan pada otot; kerusakan otak tidak terlalu berpengaruh kepada kadar CPK dalam serum, mungkin karena hanya sedikit dari enzim itu dapat melintasi sawar (barrier) darah-otak.

KEGUNAAN DALAM DIAGNOSTIK

            Kerusakan macam apapun pada otot bergaris atau otot jantung meningkatkan  kadar CPK dalam serum. Nilai-nilai 2-5 kali dari yang normal di temukan setelah rangsangan minimal seperti olahraga berat, injeksi intramuscular, delirium tremens dan pada tindakan bedah yang menyayat atau menindas otot bergaris.

            Peningkatan CPK yang sunguh-sunguh menyolok didapat pada tahap ini distrofia otot (progresif muscular dystrophy), tetapi penigkatan ini berkurang penyakit berlanjut dan masa otot menyusut. Kalau penyakit itu sudah tahap akhir, kadar CPK mungkin normal. Wanita yang heterozigotdalam gen yang menjadi sebab distrofia otot Duchenne itu, mempunyai kadar CPK yang rata-rata lebih tinggi dari wanita normal, tetapi selisih itu tidak terlalu menonjol sehingga tidak miungkin atas dasar nilai itu mengambil kesimpulan apakah seorang wanita itu seoran gkarier atau tidak.

Infark miokard akut melepaskan CPK ke dalam serum dalam 48 jam setelah kejadian dan nilai menjadi normal lahi lewat kira-kira 3 hari. Kalau kemudian nilai itu meninggi lagi, itu menjadi petunjuk terjadi infark baru atau peluasan kerusakan pertama, asal saja tidk ada otot lain yang menjadi sumber lain CPK dalam serum. Didalam hati tidak ada CPK, nilai CPK meniggi menolong utuk membedakan infark miokard dari gagal jantung kongesti dan kondisi-kondisi lain yang mengganggu hati. Hipotiroidisme menyebabkan nilai CPK dalam serum menjadi tinggi. Dalam table 3 terpampang sebab-sebab kadar CPK meninggi.

Peningkatan Tegas (5 Atau Lebih Kali Nilai Normal) Dystrophia Miscularis Duchene Polimisitis Infark Miokard Penigkatan Ringan atau Sedang (2-4 kali nilai normal) Kerja sangat berat, trauma, tidak bedah, intra intramuscular Delirium tremens, myopatia alcoholic Infark miokard, kerusakan oleh inscemia berat Infark paru Edema paru (beberapa pasien) Hipotirodisme Psikosis akut

ISOENZIM

            Molekul CPK merupakan dimer, kedua belahan mungkin sama, mun berbeda. Rantai penyusun dimer itu dinamai M (Muskular) dan B (Brain). CPK dari otak hampir semua terjadi dari dimer BB, otot bergaris berisi sekitar 90% MM dan 10% MB, sedangkan otot jantung berisi 60% MM dan 40% MB. Enzim yang ada dalam serum normal hampir semua MM, dan hany MM meninggi pada kerusakan otot bergaris. Kadae isoenzim MB hanya meningkat kalau otot jantung mengalami kerusakan.

Tabel kondisi yang menigkatkan laktat dehidrogenase (total)

Peningkatan tegas (5 atau lebih kali normal) Anemia megaloblastik Karsinoma tersebar, khususnya metastase ke hati Renjatan dan hipaksia Hepatitis Infark miokard Peningkatan sedang (3-5 kali nilai normal) Infark miokard Infark paru Kondisi hemolitik Leukemia Mononucleosis infeksiosa Delirium tremeus Distrofia otot Peningkatan ringan (sampai 3 kali nilai normal) Kebanyakan dari penyakit hati Sindrom neprotik Hi[potiroidisme Kholangitis

            Dalam menyusun diagnosis banding pada perasangkaan infark miokard adanya CPK-MB merupakan keras ke arah kerusakan jantung yang tidak perlu berarti infark jantung. Baik CPK total, maupun infark MB dapat meningkat pada angina pectoris atau pada pengguna ischemic yang revelsibel. Alasanya, mungkin jumlah sel yang rusak kurang banyak, mungkin sirkulasi darah sekitar jaringan rusak  kurang memadai sehingga enzim tak dapat masuk ke dalam peredaran darah, mungkin lagi pemeriksaan laboratorium terlalu lambat dilakukan. Isienzim MB hanya sebentar saja ada dalam serum, munculnya 6-24 jam setelah kejadian, sedangkan setelah 73 jam ia tidak ada lagi.

GAMA GLUTAMIL TRANSPEPTIDASE

MAKANAN PATOFISIOLOGIK

Gama glutamine traspeptidase (GGT, gamma glutamyl traspeptidase) mengkatalisi pemindahan gugusan glutamil  antara peptide atau asam amino. Sel epitel tubuli ginjal mengandung banyak, sedangkan hati dan pangkreas  berisi agak banyak enzim itu. Enzim yang ada dalam terutama berasal dari hati bersama saluran empedu, jadi peningkatan kadar mengarah ke penyakit hepatobiliar.

GGT meningkat sama maknanya dengan fospatase alkalis yang meningkat, sedangkan polanya juga sama. Sangant tinggi nilainya pada penyakit obstruksi dan karsinoma hepatoseluler dan oeningkatan sedang pada ddegenerasi hepatoseluler. Penyakit tulang tidak berpengaruh pada GGT dank arena itu GGT lebih spesifik sebagai indicator kepada penyakit hati dari pada fospatase alkalis. Tetapi biasanya GGT tidak dapat menmbah informasi daripada yang sudah diketahui dengan mengukur fospatase alkalis.

ALKOHOL DAN RANGSANGAN PRODUKSO ENZIM

            Banyak GGT dalam sel-sel hati bertambah  kalau terjadi rangsangan kepada system mikrosom. Barbiturate, fenitoin dan alcohol merupakan perangsang produksi enzim. Nilai GGT dalam serum meningkat kalau hati terkena rangsangan terus-menerus oleh zat-zat macam tadi.  Jika minum alcohol enam kali sehari atau lebih sering, GGT dalam serum jelas meningkat dengn terus menerus. Kalau minum kurang dari itubiarpun biasanya ada peningkatan sedikit,  biarpun tidak dapat ditemukan adanya penyakit hati. Nilai GGT dapat membantu untuk mengetahui apakah seseorang betul-betil sudah minum lagi. Mengukur nilai GGT dapat membantu untuk mengetahui seseorang betul-betul sudah tidak minum lagi. Tetapi belum ada kepastian apakah tinggi nilainya dapat dipakai selaku indicator untuk memastikan apa seseorang pasien yang berobat untuk penyakit itu peminum ringan atau peminum berat.

LAKTAT DEHIDROGENASE

            Banyak jaringan mengandung laktat dehidrogenase (LDH) yang mengkatalisis perubahan refelsibel laktat ke virupat. Karena ia begitu luas tersebar dalam macam-maca jaringan,  maka penigkatan LDH adalah sangan non-spesifik. Pada tabel dilihat kondisi-kondisi yang disertai peningkatan LDH. Laktat dehidrogenase yang berasal dari jaringan-jaringan yang berbeda-beda, dapat dikenali dengan melakukan analisis isoenzim; analis serupa itu lebih berguna untuk menilai perubahan-perubahan pada lDH dibandingkan dengan enzim-enzim lain.

ISOENZIM

            Molekul aktip LDH tersusun dari empat rantai polipeptida.  Ada dua macam rangkaian polipeptida, rangkaian H dan M; tetramer yang menyusun molekul LDH bias berkombinasi secara acak dari rangkaian H dan M. Tetramer  yang tersusun dari dari empat rangkaian  H bergerak paling cepat kearah anoda pada elektrofoesis, sedangakan yang berisi empat potongan M itu paling lambat. Isoenzim-isoenzim diberi nomor dari 1-5 seperti terlihat pada tabel.

Tabel. Isoenzim-isoenzim laktat dehidrogenase

Isoenzim	Kompasisi Rantai	%dri ttl yg normal dlm serum	Jaringan yg ky akan isoenzim
LD1	HHHH	29-37	Jantung,otak,eritrosit
LD2	HHHM	42-48	Jantung,otak, eritrosir
LD3	HHMM	16-20	Otak, ginjal, paru
LD4	HMMM	2-4	Hati, otot rangka, gimjal
LD5	MMMM	0,5-1,5	Hati,otot rangka,ileum

Kegunaan dalam Klinik

            Melakukan penetapan LDH total dan isoenzim-isoenzim secara tergabung sangat bergunadalam diagnostic. Kadang-kadang nilai LDH total meningkat dalam hubungan tertantu sehungga jaringan asal dengan sendirinya sudah jelas, seperti pada anemia megaloblastik, hemolisis, distrofia otot atau mononukleus infeksiosa. Analisi isoenzim berguna pada albagasi situasi seperti ; membedakan infark miokard dari kejadian di paru atau dihati ; mendiagnosis infark miokard dalam situasi yang sukar, umpamanya dalam masa pasca bedah atau pada renjatan berat; menemukan hemolisis di samping hipaplasia sum-sum tulang.

            Dalam keadaan normal LDH­­­₅  merupakan hanya bagian amat kecil dari LDH total dalam isoenzim itu mungkin meningkat tinggi tanpa ada penigkatan LDH total sampai melampaui batas normal. Infark paru khususnya meninggalkan LDH₄ dan LDH­₅ (kadang-kadang LDH₃), sedangkan infark miokard dengan LDH₁ dan  LDH₂.

Perbandingan LDH₁ dan LDH₂ yang terbaik

            serum normal berisi lebih banyak LDH₁ dari LDH₂. Khususnya miokard dan eritrosit merupakan sumber kaya LDH₁, sehingga kerusakan pada jaringan-jaringan itu menyebabkan perbandingan LDH₁  : LDH₂ menjadi terbaik. Dalam 48jam pertama dari infark miokard pada 80% dari pasien ditemukan keterbalikan perbandingan LDH₁ : LDH₂  LDH₁ menjadi lebih besar dari LDH_2. Perbandingan terbalik itu sangat penting dan itu bias terjadi dengan atau tanpa penigkatan LDH total. Keterbalikan itu hanya singkaat adanya. Satu minggu setelah infark terjadi, LDH total mungkin masih tinggi, tetapi pola normal LDH₂ > LDH₁ biasanya tercapai kembali. Adalanya keterbalikan dalam perbandingan LDH₁ dan  paling berarti dalam diagnosis eritrosit dan infark ginjal ; kemungkinan-kemungkinan itu harus dapat disingkirkan trlebih dahulu sebelum boleh dikaitkan dengn infark miolard.

Hidroksibutirat Dehidrogenase

            Beberapa dari isoenzim-isoenzim LDH  lain, LDH₁ tahan pemanasan sampai 65⁰C.  ada laboratorium-laboratorium yang tidak melakukan elektrofoesis isoenzim; mereka memeriksa beberapa banyak LDH  yang ada than panas. Isoenzim LDH dikatakan meningkat apabila labih dari 29-37% dari LDH total bersifat tahan panas. Aktifitas LDH₁  praktis sama dengan aktifitas HBD dan serum, karena informasi sama dapat diperoleh dari elektrofoesis LDH atau dari pengukuran banyaknya LDH yang tahan panas.

MENANGANI SPESIMEN

            Spesimen untuk analisis LDH samasekali tidak boleh ada hemolisis dan serum harus segera dipisahkan guna mencegah eritrosit-eritrosit melepaskan LDH₁ . enzim LDH relatip stabil pada suhu kamar, tetapi pemeriksaan sebaikanya dilakukan waktu kuran gadari 48jam. LDH₄ dan LDH₅ berkurang sebanyak pada suhu rendah, karena itu spesimen untuk analisis isoenzim LDH jangan disimpan dalam lemari es.

LIPASE

            lipase ialah enzim yang mencegah trigliserida menjadi asam lemak dan gliserol. Enzim semacam itu ada beberapa jenis dan masing-masing mempunyai substrat yang spesifik baginya, tetapi secara menyeluruh aktipitas lipolitik enzim-enzim itu menggolongkannya sebagai lipase. Pancreas adalah sumber satu-satunya lipase yang disekkresikan ke dalam lumen saluran cerna.  Kadar lipase dalam serum  berkaitan lebih spesifik dengan pangkreas dari kadar amylase. Tetapi ters untuk menetapkan kadar lipase bersifat dan lebih sulit dari pengukuran amylase. Kadar lipase dalam serum meningkata pada radang pangkreas dan peningkatan itu tinggal lebih lama dibandingkan dengan kadar amylase. Lipase tidak dikeluarkan ke dalam urin.

Kadar lipase dalam serum yang tertinggi terjadi pada pangkreatitis akut, tetapi karsinoma pancreas menyebabkan penigkatan sedang yang terus menerus. Morfin dan obat cholinergic berpengaruh pada kadar lipase kea rah sama seperti kepada lipase.

Lipase dalam serum tahan simpan sampai seminggu atau lebih. Spesimen yang mengalami hemolisis sedikit boleh dipakai untuk analisis, tetapi kalau hemolisis berat, penetapan akan terganggu.

LIPOPROTEIN LIPASE

Lipase-lipase yang melepaskan asam lemak dari lipoprotein dan membersihkan darah dari kilomikron, jauh berbeda dari lipase yang ada dalam saluran cerna.  Darah puasa berisi sedikit kilomikron dan mempunyai aktifitas lipoprotein lipase rendah. Setelah bersantap, darah orang normal dibersihkan dari kilomikron oleh lipase yang terikat pada membrane sel hati(lipoprotein lipase hepatic) dan oleh enzim-enzim yang diperkirakan  terikat pada membrane endotel kapiler (lipoprotein lipase ekstrahepatik). Pemberian heparin melepaskan lipase-lipase itu yang terikat pada membrane dan kadarnya dalam plasma dapat diukur sebagai aktifitas lipolitik pasca heparin (PHLA, postheparin lipolytik activity). Orang dengan hiperlipoproteinemia tipe 1 mempunyai kadar kilomikron puasa yang amat tinggi dan PHLA yang tegas lebih dari normal. Kilomiron juga menigkat pada hiperlipoproteinemia  tipe v, tetapi orang-orang itu mempunyai PHLA normal atau dekat normal.

Fosfatase

Dalam serum ada bermacam-macam enzim yang melepaskan fosfat dari senyawa-senyawa yang berisi satu gugus fosfat; enzim-enzim itu secara kolektif diberi namaortofosfat ester monohidrolase, tetapi masing-masing enzim mempunyai substrat dan pH optimal sehari-hari. Telah menjasi kebiasaan untuk menggolongka semua enzim yang optimal aktip pada  pH 5 sebagai fosfatase asam (ACP, acid Phosphatase) dan yang paling aktif pada pH 9 sebagai fosfatase alkalis (ALP, alkalin phospatase). Enzim-enzim itu sudah bertahun-tahun dipelajari  dan dalam literature dipakai banyak macam teknik, substrat dan nilai rujukan.

FOSFATASE ASAM

Banyak jaringan berisi ACP, tetapi yang paling banyak mengandung adalah kelenjar prostat, eritrosit, dan trombosit. ACP dalam serum diukur terutama untuk menemukan adanya dan luas menyebarnya karsinoma prostet. Peningkatan ACP dari eritrosit tidak mempunyai makna diagnostik , biarpun pada penyakit gaucher dan bermacam-macam penyakit tulang metabolic ditemukan kadar yang tinggi.

ACP dari Eritrosit dan Prostat

ACP dari eritrosit berlainan dari ACP dari prostat karena substret yang paling sesuai untuk masing-masing jenis itu berbeda dan karena zat yang menghambat enzim masing-masing berbeda juga. Cara menetapkan menurut Bodansky yang memakai beta-gliserofosfat sebagai substrat lebih sesuai denga ACP dari prostat; sedangkan cara Gutman dan King-Amstrong  mengukur ACP dari eritrosit dan prostat bersama-sama. Serum normal mengandung lebih banyak ACP dari eritrosit dibandingkan ACP dari prostat; perubahan-perubahan yang mungkin terjadi dalam fraksi ACP dari prostat sukar ditemukan. Asam tartrat menghambat ACP dari prostat, banyak laboratorium melaporkan banyaknya ACP  yang dapat dihambat oleh tartrat di samping ACP total; itu dilakukan untuk menonjolkan banyaknya enzim dari prostat/

Karsinoma Prostat

            ACP dari prostat meningkat pada 50-75% dari pasien karsinoma prostat yang telah meluas sampai du luar prostat.² karsinoma itu biasanya menyebarkan metastasisnyake tulang, tetapi berluasan dalam pinggul juga meningkatkan ACP. Kalau kanker itu masi ada dalam kelenjar, peningkatan ACP hanya ditemukan pada 10-25% dari pasien. ACp kembali menjadi normal 3-44 hari setelah berhasilnya terapi estrogen. Jika kemudian nilai itu meninggi lagi, itu petunjuk kuat kearah metastasis di tulang yang akltif. Hyperplasia prostat yang jinak, radang atau ischemia hamper tak pernah mengubah kadar ACP.

            Tehnik radioimmunoassay pernah dipakai untuk meningkatkan identifikasi dan penilaian banyaknya ACP  dari prostat, tetapi hasilnya tidak mantap. Penelitian-penelitian telah membuktikan bahwa adanya karsinoma prostat dluar kelenjar tetap masih paling bagus dilakukan perabaan jari seorang klinikus yang berpengalaman. Penepatan kadar ACP tidak dapat menentukan dengan pasti apakah kanker prostat ada atau tidak ada, tetapi penetapan ldapat memperkuat diagnosis dan berguna juga untuk menguji hasil terapi.

            Specimen tidak bole mngalami hemolisis dan serum harus segera dipisahkan dari sel-sel darah. Bila tes tidak dapat dilakukan selang beberapa jam, serum harus dibekukan.

FOSFATASE ALKALIS

Janis-jenis enzim

            Fosfatase alkalis (ALP, alkaline phosphatase) dibuat oleh bermacam-macam jaringan. Hati, tulang dan usus adalah sumber-sumber paling penting ; dalam kehamilan plasenta menjadi sumber yang subur juga. Beberapa jenis kanker tertentu memuat sedikit ALP yang khusus dan yang disebut enzim mregan¹⁸ . dalam serum normal yang paling banyak terdapat adalah ALP dari tulang, di samping itu ada sedikit isoenzim yang berasal dari hati. Kadar ALP dari usus berbeda-beda dari seorang kepada yang lain, kebanyakan orang mempunyai kadar yang relative rendah, tetapi kadang-kadang orang yang menunjukan kadar isoenzim itu meningkat. ALP dari usus sepintas masuk ke dalam darah pada waktu lemak dicerna dandiserap, tetapi penyakit intestinal jarang berpengaruh, kepada kadar ALP dalam serum.

Makna patofisiologis

            Mengukur ALP bermanfaat pada penyakit hati dan tulang. Kegiatan osteoblastik dan osteoklastik meninggikan Alp dalam serum, kadar itu bertambah pada waktu terjadi pertumbuhan tulang, perombakan tulang dan kalau tidak ada keseimbangan antara kedua prose itu. ALP hati terutama berasal dari epitel saluran empedu intrahepatik; ,masih tidak jelas sampai di mana aktifitas sel hati beperan dalam prose itu. Pada penyakit haptobiliar perembesan ALP ke dalam cairan interstisial mempunyai efek sama atau lebih besar dari pada obstruksi atau peradangan pada saluran-saluran hepatobiliar. Penyakit parenkrim biasanya tidak menyebabkan peningkatan begitu tinggi. Penggolongan diagnostic dapat dilihat pada table 6

Pemisahan Isoenzim

            Biasanya tidak ada kesulitan untuk membedakan antara ALP dari hati dan dari tulang pada keadaan yang di sertai peningkatan ALP; tetapi ada kalanya itu susah juga. Elektoforesis pernah diterapkan dalam upaya memisahkan isoenzim ALP, tetapi suksesnya kurang baik, memisahkan isoenzim hati dan isoenzim usus lebih mudah dari membedakan isoenzim hati dari isoenzim tulang. Memanaskan serum sampai 56⁰ C adalah cara yang paling biasa pada upaya fraksionasi; ALP dari hati lebih tahan panas dari ALP dari tulang. Peningkatan kadar enzim-enzim lain lyang juga mempunyai kaitan dengan hati dapat membantu untuk menentukan apakah sumber meningkatnya ALP itu hepatobiliar. Untuk tujuan itu dipakai penetapan GGT, leucine aminopeptidase (LAP) dan 5-nukleutidase (5^”- N).

Tabel 6 kondisi yang meningkatkan fosfatase alkalis Peningkatan tegas (5 atau lebih kali nilai normal) Obstruksi saluran empedu (intrahepatik atau ekstrahpatik) Sirosis biliar                 Osteitis deformans                 Sarcoma osteogenik                 Hiperparatroidisme Peningkatan sedang (3-5 kali nilai normal) Penyakit granulomatosa atau infiltrative dalam hati Mononukleusis infeksiosa Metastasis tumor ke tulang Penyakit tulang yang metabolic (rhachitis, osteomalacia) Peningkatan ringan (sampai 3 kali nilai normal) Hepatitis oleh virus Sirosis (sering ada isoenzim dari usus) Patah tulang dalam penyembuhan Anak normal dalam masa pertumbuhan

 

           

Tes untuk LAP 5^”- N tidak begitu banyak tersedia karena pemeriksaan-pemeriksaan itu tidak banyak menambah informasi kepada apa yang sudah didapat dengan memriksa ALP dan tes fungsi hati lain-lain.