Pemeriksaan Ureum Darah

• Prinsip

Urea dihidrolisa dengan adanya urease menjadi ammonia dan CO₂. Amonia yang dihasilkan dengan 2-oxoglutarate dan NADH dengan adanya GLDH membentuk glutamate dan NAD. Reaksi pemeriksaan ureum

                                          Urease

          Urea + H₂O + 2H+ ------------> 2NH₄+  + CO₂

                                                                    GLDH

          2NH₄+ + 2-oxoglutamate + 2NADH ---------> H₂O+ 2NAD- +glutamate

•   Komposisis Reagensia / Pereaksi :

·           Reagen                                                 1 :
- Tris buffer pH 8,0                                      80 mmol/l

      - 2-Oxoglutarate                                  15 mmol/l

·           Reagen 2 :

      - GLDH                                                 6000 U/l

      - NADH                                                0,32 mmol/l

      - Urease                                               >100 U/ml

·           Reagen 3 :

      - Urea                                                  50 mg/dl

•    Persiapan reagen kerja :

Encerkan 1 botol R2 dengan 1 botol R1, campur pelan-pelan, biarkan 30 menit. Stabil 3 hari pada +20^oc s/d +25^oC atau 14 hari pada suhu 4^oc s/d +8^oC

•  Specimen / bahan pemeriksaan :

-      Serum

-      Plasma heparin / EDTA

-      Jangan gunakan ammonia heparin

•   Instrument :

-      Spektofotometer, Photometer, tebal kuvet 1 cm

-      Tabung reaksi sedang

-      Clinipette / mikropipet 1000 ul, dan 10 ul

-      Rak tabung

-      Stopwatch

•  Cara Kerja :

 
  

Perhitungan :

1.         Cara Kinetik :

Hitunglah ΔA = (A2-A1)

ΔA sampel

       -------------  x konsentrasi standart =   mg/dl

 ΔA standart

2.        Cara Endpoint :

A sampel

-------------  x konsentrasi standart =   mg/dl

A standart

•  Nilai Normal : 15 – 45 mg/dl